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qa-bio LT-MONO-96說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2018-12-20      點(diǎn)擊次數(shù):2764

 

QA-Bio是一家致力于提供糖基化研究工具的公司,所提供的糖基化研究產(chǎn)品涵蓋糖苷內(nèi)/外切酶,去糖基化沒(méi),唾液酸產(chǎn)品,多糖產(chǎn)品純化試劑盒,多糖標(biāo)記試劑盒等,同時(shí)提供多糖分析服務(wù)。

 

qa-bio LT-MONO-96說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品編號(hào):LT-MONO-96

 

單糖分析試劑盒

LudgerTag單糖分析試劑盒包含用于蛋白生物制藥和標(biāo)準(zhǔn)品上發(fā)現(xiàn)的單糖釋放和熒光標(biāo)記的試劑。

單糖分析是ICH Q6B生物制藥表征指南中規(guī)定的法規(guī)要求。該信息可用于藥物開(kāi)發(fā)的所有階段,作為確定糖基化類(lèi)型(N-連接和/或O-連接)和糖基化發(fā)生程度的方法。它還可用于證明制造過(guò)程中QC批次釋放的批次之間的一致性。

一個(gè)LudgerTag單糖分析試劑盒包含試劑,每套試劑可釋放和標(biāo)記多達(dá)96個(gè)獨(dú)立的分析樣品,兩套試劑(每組48個(gè)樣品)。通常,每個(gè)樣品分析50微克糖蛋白。

單糖分析的方法如下:
1。通過(guò)弱酸水解從糖蛋白中釋放單糖。
2.用2-氨基苯甲酸(2AA)熒光標(biāo)記釋放的單糖。
3.通過(guò)HPLC或UHPLC對(duì)2AA標(biāo)記的單糖進(jìn)行相對(duì)定量分析

該試劑盒還含有LudgerTag MonoMix,一種含有葡萄糖胺,半乳糖胺,半乳糖,甘露糖和巖藻糖的單糖標(biāo)準(zhǔn)品。木糖包含在內(nèi)部用作內(nèi)標(biāo)。

提供兩種水解酸。2摩爾三氟yi酸(2M TFA)和6摩爾濃度的鹽酸(6M HCl)。2M TFA適用于釋放中性單糖,但對(duì)于我們推薦使用6M HCl的N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)單糖效果較差。我們建議在樣品的單獨(dú)重復(fù)中使用這些酸。

LudgerTag釋放試劑
三氟yi酸 - 2M TFA 
鹽酸 - 6M HCl

LudgerTag單糖分析定量標(biāo)準(zhǔn)
MonoMix單糖標(biāo)準(zhǔn)品 - 葡萄糖胺,半乳糖胺,半乳糖,甘露糖和巖藻糖各10 nmol,br> 
木糖標(biāo)準(zhǔn)品 - 100 nmol - 用作準(zhǔn)確定量的內(nèi)部參考標(biāo)準(zhǔn)

我們還推薦純化的糖肽標(biāo)準(zhǔn)品。Ludger開(kāi)發(fā)了一種定量標(biāo)準(zhǔn)品(BQ-GPEP-A2G2S2-10U)是一種復(fù)雜的雙觸角N-連接聚糖,終止于兩種N-乙酰神經(jīng)氨酸。使用此標(biāo)準(zhǔn)將使您能夠檢查聚糖釋放,標(biāo)記和恢復(fù)的效率,并使您對(duì)單糖測(cè)量的準(zhǔn)確性有信心。

HPLC - 標(biāo)記單糖的定量分析
我們提供兩種色譜柱用于分析標(biāo)記單糖,具體取決于您是否在實(shí)驗(yàn)室中使用HPLC或UHPLC系統(tǒng)。如果使用HPLC,LudgerSep R2色譜柱(目錄號(hào)LS-R2-4.6×150)可以很好地分離大多數(shù)N-連接和O-連接聚糖中發(fā)現(xiàn)的七種主要單糖。如果您有UHPLC系統(tǒng),我們建議使用LudgerSep uR2色譜柱(目錄號(hào)LS-UR2-2.1×50),每個(gè)樣品可分離8分鐘。

溶劑:本指南中的聚糖分析梯度基于以下溶劑:
溶劑A:BPT溶劑 - 純度水基溶劑,0.2%丁胺(每升2 mL),0.5%磷酸,每升5 mL),1%4氫呋喃(每升10毫升)。
溶劑B:50%乙腈:50%溶劑A.

我們還測(cè)試了不含乙腈的溶劑系統(tǒng)。請(qǐng)咨詢(xún)更多詳情。

單糖分析參考文獻(xiàn)

Abo M,He LP,Sato K,Okubo A. 用毛細(xì)管電泳法測(cè)定用2-氨基苯甲酸衍生的單糖。 方法Mol Biol。984:45-50(2013)

Harazono A1,Kobayashi T,Kawasaki N,Itoh S,Tada M,Hashii N,Ishii A,Arato T,Yanagihara S,Yagi Y,Koga A,Tsuda Y,Kimura M,Sakita M,Kitamura S,Yamaguchi H,Mimura H ,Murata Y,Hamazume Y,Sato T,Natsuka S,Kakehi K,Kinoshita M,Watanabe S,Yamaguchi T. 作為生物制藥的碳水化合物測(cè)試的單糖組成分析的比較研究。Biologicals May; 39(3):171-80。(2011年)

He L,Sato K,Abo M,Okubo A,Yamazaki S. 通過(guò)毛細(xì)管電泳分離用2-氨基苯甲酸衍生的糖類(lèi)及其通過(guò)核磁共振的結(jié)構(gòu)考慮。 Anal Biochem。3月1日; 314(1):128-34(2003)

Saddic GN,Dhume ST,Anumula KR。使用高熒光鄰氨基苯j(luò)ia酸(AA)標(biāo)簽通過(guò)HPLC進(jìn)行糖蛋白的碳水化合物組成分析。方法Mol Biol。446:215-29(2008)

Sato K,Sato K,Okubo A,Yamazaki S. 通過(guò)毛細(xì)管電泳測(cè)定用2-氨基苯甲酸衍生的單糖。 Anal Biochem。8月15日; 251(1):119-21(1997)

 

貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

E-PNG01

PNGase F

60 µL

E-EF01

Endo F1

60 µL

E-S001

Sialidase Au

60 µL

E-BG07

Beta Galactosidase

60 µL

KE-DG01

Enzymatic CarboRelease Kit

1 Kit

LL-ORELA-A2

Orela O-Linked Glycan Release Kit

1 Kit

LT-KDMB-A1

DMB Sialic Acid Labeling Kit

1 Kit

KE-SIALIQ

Sialic Acid Quantitation Kit

1 Kit

LT-MONO-96

Monosaccharide Analysis Kit

1 Kit

LT-VTAG-24

V-Tag Glycopeptide Labeling Kit

1 Kit

KE-EFX3

Endo F Multi-Kit

1 Kit

E-AG02

Alpha Galactosidase

60 µL

LL-MR-A2

Ludger Liberate Membrane Release kit

1 Kit

E-S001

Sialidase Au

60 µL

E-AM02

Core Alpha Mannosidase

60 µL

 

 

 

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