Noviocell NCS01操作說明書

syntrix-P kit

Quantity: 10 ml 
Catalog number: NCS01

Syntrix-P是一種合成基質，可用于為各種基于細胞的測定法創建定義的3D微環境。Syntrix-P已被低聚乙二醇部分官能化，從而為細胞提供了低粘附力的表面。

描述

syntrix-p試劑盒使用指南

syntrix-p是一種合成基質，可用于為各種基于細胞的分析創建定義的三維微環境。syntrix-p已被低聚乙二醇部分功能化，從而呈現出與細胞的低粘附表面。在細胞培養基存在下，syntrix-p自組裝成水凝膠，水凝膠呈現納米纖維結構，類似于天然的細胞外基質。已發現所得水凝膠支持各種細胞系（如3T3、HepG2、MDCK和CaCO-2）和原代細胞（如HUVEC、HADSC和HESC）。

工具包內容

Syntrix-P Kit                                                                     Amount

Syntrix-P (Solution A)*                                                   2 x 1.65 mL

Hyaluronic acid (Solution B)*                                          1 x 1.5 mL *

Store at -20o C

一般考慮

•仔細檢查解凍溶液A后是否有任何沉淀。如有必要，通過上下數次移液管重新溶解任何沉淀。

•解凍后，取適當體積的等分溶液A，以避免多次凍融循環。此外，將溶液A在室溫下的時間保持在低限度，即在進行實驗后立即將其放回-20°C。

•syntrix-p可用于3-9mg/ml的終基質濃度范圍。

表1中的體積導致終的基質濃度為5 mg/ml，為特定應用的優化提供了良好的起點。由于不同的細胞類型可能需要不同的濃度，我們參考了文件協議中其他濃度所需的體積

•當在96孔板1 syntrix-p試劑盒中以5 mg/ml的濃度和每孔60微升的體積使用時，可為約2.5個96孔板提供足夠的基質。

•Syntrix-P溶液呈酸性（pH 2-2.5）。包封后，凝膠的ph值將在6.5-7.5之間。ph值隨后將與添加的介質平衡

通過細胞培養基中存在的緩沖液中和SyTrIX-P的凝膠化，并在混合時立即開始。因此，“細胞懸浮液+溶液B”與“SyTrIX-P”（溶液A）的混合是非常重要的，但要快速而小心地進行（避免引入氣泡）。我們建議在混合時直接開始電鍍，因為部分形成的凝膠的破壞會對終凝膠完整性產生負面影響。

•細胞在syntrix-p中培養，濃度范圍為4*104-2.5*107細胞/ml。需要滴定法來確定實驗的宜細胞密度。

高通量實驗的一個很好的起點是以每毫升凝膠4*104–2*105個細胞的密度對細胞進行平板化。

•在電鍍后的0.5-2小時內，使用帶有酚紅pH指示器的細胞培養基制備的基質將顏色從三文魚色變為淺粉色。syntrix-p與所有標準培養基兼容。

•重要的是盡量減少氣泡的形成，因為終凝膠中存在氣泡會干擾氣泡與井的連接。

•為了填充更多的井，建議使用多通道吸管。

•Syntrix-P矩陣隨著時間的推移透明度增加。為了獲得更高的光學透明度，使用較低的凝膠體積，因為這將降低凝膠的光吸收率。

•syntrix-p是一種*定義的合成基質，與基底膜提取物相比，不含可溶性生長因子或細胞因子。為了獲得宜的細胞生長和分化，可能需要向培養基中添加生物活性分子（如生長因子、細胞因子等）。