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VSV-ΔG-熒光素酶質(zhì)粒表達載體概述

發(fā)布時間:2021/2/20      點擊次數(shù):4950

 

kerafast VSV-ΔG-熒光素酶質(zhì)粒表達載體概述:

質(zhì)粒pVSV-ΔG-熒光素酶編碼復(fù)制子限制性重組水泡性口炎病毒(rVSV)的抗原鏈(或正鏈)RNA,其中糖蛋白(G)基因被螢火蟲熒光素酶取代。該質(zhì)粒與編碼VSV核衣殼(N)、磷蛋白(P)、糖蛋白(G)和大聚合酶亞基(L)的質(zhì)粒一起使用,以回收VSV-G假型ΔG-熒光素酶病毒,如[1]所述。ΔG-熒光素酶的抗基因組RNA由噬菌體T7啟動子在pBS中表達,該啟動子已被進一步修飾,以包含用于生成VSV抗基因組RNA 3'末端的丁型肝炎核酶和克隆在pBS-SK + 中SacII和SacI酶切位點之間的T7終止子序列[2,3]。

 

重組水泡性口炎病毒-ΔG(rVSV-ΔG)已被用于生產(chǎn)含有異源病毒包膜糖蛋白的VSV假型,包括需要高水平遏制的病毒。由于rVSV-ΔG的感染性僅限于單輪復(fù)制,因此僅可使用生物安全等級2(BSL-2)防護進行病毒進入分析。

 

產(chǎn)品:

目錄號

產(chǎn)品

描述

EH1007

pVSV-ΔG-熒光素酶質(zhì)粒表達載體

10 μL(1 μg/μL)

EH1008

VSV-ΔG-熒光素酶質(zhì)粒表達載體系統(tǒng)

帶有一套輔助質(zhì)粒(VSV-N、VSV-P、VSV-L、VSV-

G)

 

質(zhì)量標準:

產(chǎn)品:

質(zhì)粒

替代名稱:

水泡性口炎病毒(VSV)ΔG-熒光素酶的抗原鏈(或正鏈)RNA

基因/插入片段名稱:

ΔG-熒光素酶

襯墊尺寸:

11,352 bp

基因種類:

水泡性口炎病毒

融合蛋白或標簽:

熒光素酶

載體骨架:

pBS-SK-ΦT

載體大小(bp):

3105 bp

克隆位點5’:

N/A(5'VSV序列直接連接到T7啟動子)

克隆位點3’:

不適用(3'VSV序列直接連接到HDV核酶)

細菌耐藥性:

氨芐西林或卡那霉素(請參見藥瓶標簽和裝箱單)

高或低拷貝:

37 ℃下在大腸桿菌中生長

備注

關(guān)于建議的方案,參見:Whitt,MA,J. Virol。Methods,2010. 169(2):p. 365-74.

發(fā)貨日期:

環(huán)境溫度(在濾紙上點樣);冷包裝(液體)

 

參考文獻:

  1. Whitt,M.A.,Generation of VSV pseudotypes using recombinant DeltaG-VSV for studies on virus entry,identification of entry inhibitors,and immune responses to vaccines.J. Virol.Methods,2010. 169(2):p. 365-74.
  2. Lawson,N.D.,et al.,Recombinant vesicular stomatitis viruses from DNA.程序未處理學(xué)術(shù)。Sci.(美國),1995. 92(10):p. 4477-4481。


 

 

  1. Stillman,E.A.,J.K. Rose,and M.A. Whitt,Replication and amplification of novel vesicular stomatitis virus minigenomes encoding viral structural proteins.J. Virol.,1995. 69:p. 2946-2953.

 

主要研究者負責申請機構(gòu)生物安全委員會對其實驗室空間內(nèi)使用重組DNA、轉(zhuǎn)基因動物或傳染性病原體的批準,并在使用這些材料期間維持機構(gòu)生物安全委員會的批準。

 

 

 


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